Populārākas Posts

Redaktora Izvēle - 2019

Kas ir pirmsimplantācijas diagnoze IVF un ko tas parāda?

Šajā sadaļā jūs uzzināsiet:

Gatavojoties veikt in vitro apaugļošanas procedūru (IVF), katrai sievietei vai laulātajam pārim ir zināmas bailes, kas saistītas ar nedzimušā bērna veselību. Patiešām, neviens nevar paredzēt, kā notiks mēslošana un cik veselīgs būs embrijs. Pat daži pilnīgi veseli pāri (to īpatsvars ir 5%) pēc bērna piedzimšanas, bērns ar ģenētisku slimību vai hromosomu anomālijas var piedzimt dabiski, un pat pirmsdzemdību seansi dažreiz nevar atklāt.

Par laimi, šodien ir metodes, kas ļauj identificēt embrija struktūras pārkāpumus pirmajās attīstības dienās. Pirmkārt, tas ir pirmsimplantācijas ģenētiskā diagnoze IVF. Izpētīsim sīkāk, kāda ir šāda pētījuma būtība.

No procedūras nosaukuma jau ir skaidrs, ka šī ģenētiskā diagnoze tiek veikta pirms embriona implantācijas, kas tika izveidots ārpus ārpuses, sievietes dzemdē. Ar dabisko koncepciju PGD netiek veikta.

PGD ​​analīze IVF ir augsto tehnoloģiju pētījums, kas tiek veikts agrīnā embriju attīstības laikā - trešajā vai piektajā dienā. Procedūras galvenais mērķis ir izvēlēties absolūti veselīgu embriju turpmākai pārstādīšanai dzemdē. Šī analīze tiek veikta ar nelielu daudzumu bioloģiskā materiāla un jāveic īsā laikā.

Ir svarīgi arī atzīmēt, ka PGD jābūt atbilstošām norādēm.:

  • mātes vecums ir vecāks par 35 gadiem
  • Nākamā tēva vecums pārsniedz 45 gadus
  • viena vai abu nākamo vecāku ģimenē tādas pašas onkoloģiskās vai ģenētiskās slimības tiek pārnestas no paaudzes uz paaudzi, t
  • augļa (vai jaundzimušā bērna) nāves mātes klātbūtne slimības vēsturē Rh konflikta dēļ;
  • pastāvīga aborts (aborts vai embrija attīstības pārtraukšana grūtniecības sākumā), t
  • neveiksmīgi IVF mēģinājumi (vairāk nekā trīs)
  • zemi vīriešu spermogrammas (spermatogenēzes traucējumi, zems spermatozoīdu skaits sēklas šķidrumā, augsts spermatozoīdu skaits ar nenormālu struktūru).

PGD ​​ļauj noteikt gan hromosomu anomālijas, gan ģenētiskās slimības embrijā. Nav izslēgts, ka pēc PGD (PGD) diagnostikas vairāku iegūto embriju IVF laikā pārstādīšana tiks pilnībā atcelta to sliktās kvalitātes dēļ (tas var notikt dažādu iemeslu dēļ). Jo vecāka ir sieviete, jo lielāks ir embriju noraidīšanas procents.

PGD ​​pētījums daļēji ir alternatīva pirmsdzemdību diagnozei, bet tā nevar, protams, to pilnībā aizstāt. Sievietēm, kas iestājas grūtniecēm pēc IVF ar PGD, kā arī visiem pārējiem, jāveic regulāras ultraskaņas pārbaudes un citi izmeklējumi, lai uzraudzītu bērna intrauterīno attīstību.

Jāpiebilst, ka šodien Krievijā ir maz centru, kur tiek novērtēti dažādi embriju genotipu veidi, izmantojot PGD ģenētiskās diagnostikas metodi IVF - Sanktpēterburgā tas ir Genesis reprodukcijas centrs. Augstas tehnoloģiskās iekārtas, embrioloģisko ārstu, reprodukcijas speciālistu, ģenētikas speciālistu kvalifikācija un ilgtermiņa prakse ļauj neauglīgiem pāriem kļūt par veselīga bērna laimīgiem vecākiem.

PGD ​​- kas tas ir?

No brīža, kad sievietes ola saplūst ar cilvēka spermas šūnu, viss ir noteikts ģenētiskā līmenī - bērna matu krāsa un augšana, intelektuālā spēja un dzimums, kā arī iespējamās ģenētiskās novirzes un slimības, ko bērns mantoja no vecākiem, vecvecākiem vai citiem radiniekiem .

Pirms implantācijas diagnostika ir genoma pētījumu komplekss, kas ļauj identificēt embrijā, kas ir tikai dažas dienas veca, dažādas attīstības novirzes, slimības, sindromi un citas nepatikšanas. PGD ​​spēj identificēt aptuveni 150 iedzimtas ģenētiskās slimības, starp kurām ir diezgan bieži sastopamas - Dauna sindroms, Turners un diezgan reti - cistiskā fibroze, hemofilija, tauriņu spārna sindroms utt.

Izmantojot īpašas metodes un augstas precizitātes iekārtas, tiek noteikti un iznīcināti slimie embriji. Transplantācijai dzemdes dobumā sievietes izmanto tikai augstas kvalitātes veselīgus un dzīvotspējīgus embrijus.

Standarta IVF neietver obligāto stadiju pirms implantācijas. Pēc apaugļošanas un embriju audzēšanas vairākas dienas novērtē tikai augšanas ātrumu, sasmalcināšanas ātrumu un embriju dzīvotspēju. Pēc tam viņi tiek pārcelti uz sievietes dzemdes dobumu. Kāds no tiem iesakņojas un sakņojas vispār, ir liels jautājums. Standarta IVF efektivitāte ir aptuveni 35%.

Ja tiek veikta diagnostika pirms implantācijas, tad nākamie vecāki nedrīkst uztraukties par bērna veselības stāvokli, pat ja viņiem pašiem ir noteiktas ģenētiskas problēmas. Turklāt IVF efektivitāte ar PGD ir nedaudz augstāka - aptuveni 40-45%. Tas ir saistīts ar to, ka lielam embrijam, pat ja tas ir implantēts dzemdē, ir ļoti maz iespēju attīstīties un izdzīvot. Veselīgs un pārbaudīts embrijs visticamāk iegūst stabilu vietu un sāk augt un attīstīties.

Apsekojuma mērķis

PGD ​​ir ļoti ieteicams vecākiem, kuriem ir ģenētiskas slimības, kuras var pārmantot bērns. Arī šāda sākotnējā embriju ģenētiskā pārbaude nebūtu ievainojama, ja nākamo vecāku tuvu radinieku rindās būtu iedzimtas slimības.

Diagnoze pirms implantācijas ir svarīga un nepieciešama pāriem, kuros viens no vecākiem ir slimība, kas saistīta ar dzimuma hromosomu. Piemēram, sieviete ved hemofilijas gēnu, bet bērns būs slims tikai tad, ja tas ir vīrietis. Šajā gadījumā PGD nosaka tikai dažu dienu vecu embriju dzimumu, un ārsti izvēlas tikai tādus embrijus, kam nav apdraudēta hemofilija, tas ir, meitenes, pārstādīšanai.

Sievietei ar negatīvu Rh faktoru un vairākām grūtniecēm pagātnē (tas nav svarīgi, kā viņi beidzās), PGD ieteicams, ja in vitro apaugļošanai izmanto vīra spermu ar pozitīvu Rh faktoru. Šajā gadījumā ārsti izvēlēsies no visiem iegūtajiem embrijiem tikai tos, kuri mantojuši mātes reusu identitāti. Šajā gadījumā grūtniecība pēc IVF turpināsies ar mazāku risku, un bērnam nebūs riska hemolītiska slimība.

PGD ​​ir ieteicams pārim, ja sievietei agrāk ir bijuši divi vai vairāk aborts, ja ir bijuši neatbildēti aborti, kā arī, ja kāds no laulātajiem pirmajā laulībā vai kopā ir bērns ar hromosomu anomālijām vai ģenētiskās patoloģijas. Diagnostika pirms pārnešanas ļauj izslēgt no embriju skaita, kas tiek ņemti vērā transplantācijai, tiem, kas slimo vai kuriem ir nevēlamas izcelsmes anomālijas.

Pirms implantācijas diagnostika otrajā vai trešajā IVF protokolā ir iespējams precīzi noteikt iepriekšējo mēģinājumu cēloņus.

Un pilnīgi nestandarta, bet, diemžēl, reālā situācija - vecāki dodas uz IVF, lai būtu bērns, kas var kļūt par donoru, piemēram, kaulu smadzenēm, savam vecākajam brālim vai māsai. Šajā gadījumā, izmantojot dabisku koncepciju, ir pārāk riskanti. Dzimis bērns, iespējams, nav piemērots kā donors slimajam radiniekam.

Pirms implantācijas diagnostika palīdzēs izvēlēties indivīdus no iegūtajiem embrijiem ar noteiktu ģenētiskās informācijas kombināciju, kas garantē ģenētisko sakritību starp bērniem. Šo pētījumu sauc par HLA rakstīšanu.

Ko parāda aptauja?

Pirms implantācijas ģenētiskā diagnoze ļauj iepriekš identificēt dažādas slimības un apstākļus, kādos bērns var nebūt dzīvotspējīgs vai invalīds. Tas viss ir atkarīgs no ģenētikas ieteikumiem. Ja nepieciešams, embrijus pārbauda tikai noteiktiem kritērijiem un gēnu mutācijām, bet kopumā ir iespējams novērtēt visus pētījumā noteiktos parametrus.

Piemēram, PGD ar precizitāti 97-99% nosaka aklumu un kurlumu, iedzimtu kurlumu, retinoblastomu, Fanconi anēmiju, neirofibromatozi, fenilketonūriju, miopātiju, vērpes distoniju, Duchenes muskuļu distrofiju un vairākus desmitus citu bīstamu un neārstējamu slimību un sindromu.

PGD ​​nosaka arī embrija embriju, tā asins grupu un Rh faktoru, dzimumu, mutāciju klātbūtni gēnu līmenī, neparastu vecākiem un pirmo reizi izpaužas.

Kas ir parakstīts?

Tā kā pirms implantācijas diagnoze pati par sevi nav lēts prieks. Ne visas sievietes, kas ir uzdrošinājušās apaugļot in vitro, ieteicams izmantot šo papildu soli. Tas tiek piedāvāts ikvienam, bet ir tādu pacientu kategorijas, kas ir ļoti nevēlamas, lai atteiktos no sākotnējā ģenētiskā novērtējuma embrijiem pirms dzemdībām.

Šie pacienti ietver:

  • "Vecums" sievietes un pāri. Ar vecumu vīriešu un sieviešu dzimuma šūnas ir vecākas un zaudē veselību. Narkotiku, sliktu ieradumu, nelabvēlīgas ekoloģijas un tikai pēdējo gadu laikā viņu DNS kopa var mutēt. Tāpēc sievietēm un vīriešiem, kas saistīti ar vecumu, augļa hromosomu anomāliju risks ir lielāks. PGD ​​ir ļoti ieteicama sievietēm, kas vecākas par 35 gadiem, kā arī pāriem, kuriem vīrietis ir vecāks par 40 gadiem.
  • Rh-negatīvas sievieteskuriem bija aborti, aborts, dzemdības, bērni piedzima ar hemolītisku slimību. Diagnoze ir svarīga tikai tad, ja laulātajam ir pozitīvs Rēzus asins faktors. Ja izmanto donora spermu, tad vīriešu biomateriālu sākotnēji izvēlas ar negatīvu Rh koeficientu, tad Rh pozitīvo embriju iegūšanas varbūtība ir nulle.
  • Sievietes, kurām jau ir pieredze 1-2 neveiksmīgos IVF mēģinājumos objektīvu iemeslu dēļ (protokoli tika veikti pareizi un bez komplikācijām, nav endometriozes un citu šķēršļu implantācijai).
  • Ja vīriešu sperma tiek izmantota mēslošanai ar zemu spermas kvalitātes rādītājiem (teratozoospermija, azoospermija, astenozoospermija). Ar dabisko koncepciju, zemas kvalitātes spermas šūnas mirst, tām nav iespējas apaugļot, ar IVF tās var labi apaugļot olu, jo dabiskā atlase ir traucēta, kas var novest pie dažādu patoloģiju rašanās auglim.

Diagnostikas veidi

Ir vairāki embriju ģenētiskās diagnozes veidi. Tie atšķiras atkarībā no pētniecības, tehniskās nianses, aprīkojuma un pētniecības metodēm. Mēs uzskaitām galvenos, nenonākot laboratorijas un ģenētiskās detaļas:

  • ZIVIS - Šī ir fluorescējošās hibridizācijas metode. Tas ir diezgan standarta pētījums, kura izmaksas ir zemas, salīdzinot ar citām pirms implantācijas diagnosticēšanas metodēm. Bet tās precizitāte ir nedaudz zemāka nekā citu metožu precizitāte. Šo metodi plaši izmanto klīnikās Krievijā, Ukrainā un Baltkrievijā. Ārvalstu klīnikas to praktiski pameta, jo parādījās precīzāki pētījumi. Plus fakts, ka pētījums notiek ātri - dažu stundu laikā. Negatīvie ir tas, ka daudzas hromosomas netiek pat pētītas.
  • CGH - salīdzinošā genoma hibridizācijas metode. Ļoti dārgs veids. Un gan finansiāli, gan uz laiku. Tomēr identificēto patoloģiju saraksts ir lielāks nekā iepriekš aprakstītās metodes, un precizitāte ir neizmērojami augstāka. Cita starpā šī diagnostikas metode pirms pārstādīšanas ļauj noteikt, kuriem embrijiem ir lielākas implantācijas iespējas.
  • PCR - polimerāzes ķēdes reakcijas metode. Tas atklāj embrija, tās asins grupas, kā arī diezgan plašu ģenētisko problēmu sarakstu. Pētījumā ir pieprasīta obligāta bioloģisko vecāku pārbaude ģenētiskām mutācijām. Ja sieviete saņem donora embriju vai donora oocītus mēslošanai, PCR metodi nevar izmantot.
  • Ngs - secības metode. Tā ir moderna metode pirms implantācijas, kas apvieno vislabāk minētos. Tomēr tas sniedz pilnīgāko priekšstatu par embriju veselības stāvokli un tā izmaksas ir augstākas nekā citu metožu izmaksas.

Kā notiek pētniecība?

Lai embriologi un ģenētikas speciālisti spētu veikt PGD, iepriekšējas hormonālas stimulācijas laikā jāiegūst pietiekams skaits olu. Ja tas ir mazāks par 3-4, parasti pirms implantācijas diagnoze netiek veikta. Pēc tam, kad ārsti organizē olu sanāksmi ar attīrītu spermu, embriju attīstību novēro 2-5 dienas. Tad embriologs var izvēlēties dzīvotspējīgāko. Piektajā dienā blastocistiem jau ir aptuveni 200 šūnu. Neierobežojot embriju, no katras embrijas ir iespējama ģenētisko pētījumu veikšana.

Mūsdienīgi augstas precizitātes lāzeri tiek izmantoti šūnu savākšanai, šūnu čaumalas tiek biopsiju un tiek izmantotas citas metodes. DNS virknes aptauja sniedz visaptverošu informāciju par to, vai embrijs ir vesels. Pēc tam tas ir ieteicams pārvietošanai.

Ja pāris piekrīt embriju sākotnējai ģenētiskajai diagnostikai, embrija pārnešana var aizkavēties. Ja ar standarta IVF protokolu tiek veikta 2, 3 vai 5 dienas pēc mēslošanas brīža, tad PGD rezultātus var sagaidīt no vairākām stundām līdz 5-6 dienām. Tādējādi IVF cikls tiek pagarināts vismaz par nedēļu. Protokola izmaksas var palielināties, ja piekrišana embriju provizoriskajai diagnozei ir 40-240 tūkstoši rubļu.

Tas viss ir atkarīgs no tā, cik embriju jūs plānojat pārbaudīt, kura iepriekšminētā metode tiks pārbaudīta.

Lai samazinātu izmaksas, pāris var izmantot kvotu rīkus, diagnostika ir iekļauta pakalpojumu sarakstā, ko var sniegt OMS, bet katrai klīnikai vajadzētu šo jautājumu izskaidrot atsevišķi. Daži to dara PGD uz budžeta rēķina, citi - ne.

Iespējamās komplikācijas

Kā jau minēts, materiāls ģenētikas izpētei tiek iegūts, izmantojot biopsiju. Neskatoties uz ultramodernām precīzijas iekārtām, šīs procedūras laikā vēl ir iespēja ievainot augli. Visbiežāk ievainotie tiek pakļauti "trīs dienām". Jāatzīmē, ka traumas varbūtība ir diezgan zema - apmēram 3%, un pētījuma ieguvumi būs daudz lielāki. Pretējā gadījumā šīs IVF komplikācijas var būt tādas pašas kā IVF standarta protokolā.

Jebkurš no in vitro apaugļošanas posmiem var būt saistīts ar dažiem riskiem, un tas nekur nebūs. Ir svarīgi, lai visi riski būtu zemi.

Pārim ir jābūt labi informētam, ka pat mūsdienīgi un precīzi instrumenti, ar kuriem strādā augstākās kvalifikācijas kategorijas ārsti, negarantē 100%, ka bērns būs vesels. Tādējādi ar plašām mozaīkām var rasties bioloģiskas kļūdas, un slimu embriju var pārnest uz sievieti. Šī varbūtība ir, bet tā ir ļoti maza - ne vairāk kā 0,05%.

Saskaņā ar Pasaules Veselības organizācijas oficiālo informāciju IVF ar PGD palielina protokola panākumu iespējamību par aptuveni 7-10%, salīdzinot ar 35% no bāzes. Tomēr interneta segmentā nav tik daudz pozitīvu vērtējumu par pirms implantācijas veiktu diagnostiku.

Dažas sievietes atzīmē, ka embriju, no kuriem tika ņemtas analīzes, izdzīvošanas līmenis ir nedaudz sliktāks, un tādēļ ir diezgan maz pārskatu par neveiksmīgiem IVF protokoliem ar sākotnējo augļa ģenētisko diagnozi. Zāles neapstiprina šo populāro viedokli, un oficiālā statistikas statistika neliecina par samazinātu procentuālo daļu veiksmīgas implantācijas pēc embriju pārbaudes.

Bieži vien sievietes jautā, vai ir iespējams izdarīt IOP, lai izvēlētos bērna dzimumu, jo papildus tam, ka es tiešām gribu bērnus, es joprojām gribu vai nu dēlu vai dēlu. Tehniskā spēja noteikt dzimumu ir tur, bet neviens ārsts nenošķir “nevajadzīgā” dzimuma embrijus, ja vien nav konkrētas norādes par ģenētiku. (par slimībām, kas saistītas ar dzimuma hromosomu). Krievijā ir aizliegta embriju diskriminācija pēc dzimuma.

Saskaņā ar pārskatiem pašas diagnostikas process, kas var ilgt vairākas dienas, sievietei sniedz daudzas pieredzes, jo viņa nezina, cik pēdējā laikā izrādījās daudz augstas kvalitātes embriju un vai tie izrādījās vispār. Помимо того, ей нужно поддерживать состояние эндометрия в нужной форме -принимать назначенные лекарства, сдавать кровь на прогестерон, делать несколько УЗИ, чтобы определить толщину функционального слоя матки. Это важно, чтобы перенос прошел максимально успешно и плодное яйцо смогло имлантироваться.

Случается, что пока идет диагностика, «удачное» для переноса время проходит. Šādā gadījumā protokolu var pārtraukt, un embriji, kas ir izturējuši testu, ir iesaldēti un nosūtīti uz kriegānu. Pārsūtīt tos būs nākamajā protokolā.

Par pirmsimplantācijas ģenētiskās diagnozes sarežģītību skatiet šo videoklipu.

medicīniskais recenzents, psihosomatikas speciālists, 4 bērnu māte

Kas ir PGD

Laboratorijā tiek pētīta olu vai embriju hromosomu kopa. Ņemot vērā embrija agrīno attīstību, ievainojumu risks tiek samazināts līdz 1%. Procedūra ir noteikta paralēli protokolā paredzētajai galvenajai ārstēšanai. Tomēr tai būs vajadzīgi vairāk folikulu, tāpēc olnīcu hormonālā stimulācija tiek veikta intensīvākā režīmā.

Ne visas kromosomu mutācijas vecākiem apdraud viņu bērna veselību. Patoloģijas attīstība ir atkarīga no gēnu pazīmēm un kombinācijas mammai un tētim.

Ir divu veidu mutācijas pazīmes: dominējošais un recesīvais. Dominējošā mutanta gēna pārnešana uz bērnu palielina patoloģijas risku bērnam par 50%. Ja vecāki ir recesīvās iezīmes pārvadātāji, tad ģenētiskā slimība parādīsies, kad bērns nonāks gan mamma, gan tēva „slimi” gēni.

Turklāt dažas ģenētiskas patoloģijas, kas saistītas ar seksu. Tādējādi sievietes divdesmit trešā hromosomu pāris izskatās kā XX, un vīrišķais XY. Tāpēc pārkāpumi vienā sievietes hromosomā neradīs slimību, jo otrajā vietā tiks bloķēta tās darbība. Vesels dzimušais bērns turpinās bojātās hromosomas "nesēju".

Vīriešiem šāda aizsardzība nav, tāpēc zēni viņus dzemdēs ar ģenētisku patoloģiju, un pusē gadījumu meitenes kļūs par „bojātu” hromosomu.

Izmantojot embriju pirmsstimācijas ģenētisko diagnozi, ģenētika nosaka specifisku kombināciju, ko embrijs pārmanto. Iegūtā informācija ļauj mums noteikt, vai bērns ir piedzimis ar patoloģiju vai kļūs tikai par hromosomu defekta nesēju. Tiek pētīti visi iegūtie embriji, no kuriem atlasīti „tīri”.

Šo analīzi nevajadzētu jaukt ar ģenētisko pārraudzību pirms implantācijas. Atšķirība starp PGD un PGS ir nozīmīga. PGD ​​tiek veikta, lai identificētu neārstējamas ģenētiskās patoloģijas un mazinātu risku saslimt ar slimu bērnu. PGS ir pētījums, kas ļauj noteikt hromosomu skaitu, aneuploīdiju, kas ir saderīga ar embrija dzimšanu un augļa attīstību. Vienkārši runājot, ASG uzdevums ir palielināt grūtniecības izredzes, izvēloties veselīgus embrijus. Vecākiem, kuriem ir parakstīti PGS, nav nekādu iedzimtu patoloģiju, tomēr pastāv risks, ka viņi var būt.

Šādā nolūkā in vitro apaugļošanas procedūra tiek veikta kopā ar PGD:

  • “Novērst” embrijus, kuriem ir bojāti gēni, lai tos pārstādītu,
  • Uzziniet iemeslus, kādēļ iepriekšējie IVF protokoli beidzās bez panākumiem,
  • Samazināt risku, ka uzņemošajiem vecākiem ir bērns ar patoloģiju,
  • Nosakiet bērna dzimumu, novēršot hromosomu anomālijas pēc dzimuma,
  • Identificēt embrijus, kam ir nosliece uz ģenētiskā tipa patoloģijām, t
  • “Atrast” embriju, kas ir optimāla ar HLA sistēmu, kopā ar citiem bērniem no ģimenes, kas var kļūt par donoru ārstēšanas laikā;
  • Samazināt spontāno abortu iespējamību agrīnā stadijā,
  • Samazināt hemolītiskās slimības iespējamību,
  • Izvēlieties vienu „ideālu” embriju, novēršot iespēju vairākkārtējai grūtniecībai.

Ģenētiskā diagnostika var identificēt un novērst šādas bīstamas patoloģijas:

  • Tay-Sachs slimība,
  • Sirpjveida šūnu anēmija,
  • Gošē slimība,
  • Verdnig-Hoffman slimība,
  • Retinoblastoma,
  • Horey Huntington,
  • Dauna sindroms,
  • Neirofibromatoze,
  • Hemofilija,
  • Myopathy
  • Achondroplasia,
  • Fenilketonūrija,
  • Alpu sindroms,
  • Policistiska nieru slimība
  • Duchenne muskuļu distrofija,
  • Retinīts, pigmentoze,
  • Gottingtona slimība,
  • Dyushen Myodystrophy,
  • Cistiskā fibroze
  • Anēmija Fanconi,
  • Nedzirdīgs
  • Torsijas distonija,
  • Pemphigus,
  • Edvarda sindroms.

Šis saraksts neaprobežojas ar iesniegtajām patoloģijām: vairāk nekā 150 veidu.

Ņemiet vērā, ka tiek reģistrēti viltus negatīvie rezultāti. Fakts ir tāds, ka dažas pētniecības metodes diagnosticē tikai noteiktu skaitu hromosomu. "Neuzskaitītie" gēni var būt bojāti.

Dažreiz ir mutāciju attīstība. Pētījuma laikā šūnu diagnosticē kā veselīgu, un mutācija notiek tās attīstības laikā.

Kad ir nepieciešams PGD?

Mēs jau esam teikuši, ka PGD netiek darīts visiem pacientiem, kas pieteikušies apaugļošanai in vitro. Procedūrai ir dažas norādes:

  • Vecāki ir hromosomu defektu nesēji, tāpēc bērnu ģenētisko noviržu pārnešanas risks ir ļoti augsts. "Pārvadātājs" nodrošina hromosomu pārkārtošanās vai monogēnu slimību klātbūtni.
  • Vecāku vecuma kategorija: mātes, kas vecākas par 36 gadiem, tēvi, kuru vecums pārsniedz 40 gadus. Jo vecāki ir laulātie, jo lielāks ir gēnu mutāciju attīstības risks, pat ja potenciālajiem vecākiem ir “pareizais” hromosomu kopums.
  • Pēc iepriekšējām grūtībām bērni piedzima, kas nomira no Rh-konflikta.
  • Ir konstatēti bojāti gēni un hromosomas olās un spermā.
  • Spermogrammā ir konstatētas nopietnas novirzes cilvēkam (patoloģijas, piemēram, azoospermija vai oligozoospermija),
  • Iepriekšējie mēģinājumi iestāties grūtniecības laikā ar IVF ir bijuši neauglīgi,
  • Jaunās grūtniecības beidzas ar spontāno abortu embriju attīstības sākumposmā,

Ņemot vērā iespaidīgo ģenētisko slimību sarakstu, PGD par IVF tiek veikta visām sievietēm, kuru vecums ir sasniedzis trīsdesmit piecu gadu atzīmi. Tas ir saistīts ar vecuma izmaiņām, kas var radīt nepatīkamus "pārsteigumus" pat grūtniecības laikā. Olu novecošanu paātrina un saasina šādi faktori:

  • Ilgstoša terapija ar spēcīgām zālēm
  • Dzīvesveids pagātnē, kas saistīts ar alkohola, nikotīna, narkotiku lietošanu,
  • Hroniska patoloģija,
  • Bīstami profesionālās darbības apstākļi, t
  • Slikta ekoloģija.

Šādos gadījumos tiek parādīta ģenētiskā diagnoze:

  • Bērna piedzimšana ir saistīta ar pareizas cilmes šūnu iegūšanu, kas ir saderīgas ar HLA sistēmu, lai izārstētu vecāku bērnu,
  • Nesaderība rēzus faktors
  • Laulātie ir tuvi radinieki,
  • Pāris bija pakļauts radiācijai.

IVF ar PGD ievērojami palielina protokola izmaksas. Tāpēc sieviete patstāvīgi lemj par nepieciešamību pēc pētījuma. Atgādināt, ka in vitro apaugļošana tikai 20-40% gadījumu beidzas ar grūtniecību. Ģenētiskā diagnoze ne tikai identificēs iespējamās gēnu mutācijas, bet arī ievērojami palielinās veiksmīgas koncepcijas izredzes.

PGD ​​sagatavošana un vadīšana ar IVF

Sagatavošanās embriju ģenētiskajai diagnostikai pirms implantācijas ietver konsultāciju un pilnīgu laulāto pāru pārbaudi ar atbilstošām norādēm. Ārsts sīki izklāsta procedūras priekšrocības un mīnusus. Sievietei tiek paskaidrots, ka ģenētiskajai diagnozei ir nepieciešams vairāk nobriedušu olu. Tādēļ pastiprinās olnīcu hormonālā stimulācija, kas palielina pārmērīgas stimulācijas risku IVF laikā. Pēc visiem diagnostikas pasākumiem turpiniet PGD procedūru.

Tas sastāv no septiņiem posmiem:

  1. Olu ieguve un to mēslošana laboratorijā, t
  2. Augļa attīstība, kas ilgst 3-5 dienas,
  3. "Labāko", dzīvotspējīgāko embriju izvēle, t
  4. Šūnu ekstrakcija no biopsijas embrija,
  5. Fiksācijas blastomere,
  6. Hibridizācija,
  7. Saņemtās informācijas dekodēšana.

Vēlreiz atgādiniet, ka pētījums neietekmē embrija veselību: nedzimušā bērna orgāni un audi procedūrā nepiedalās.

Pēc atšifrēšanas ģenētists atdala piemērotus un "bojātus" embrijus. Ja tiek konstatētas 2 hromosomas, kas atbilst standartiem, tad šādi embriji tiek pārstādīti. Nevar implantēt olas ar traucētām anomālijām.

PGD ​​metodes

Modernā reproduktīvā tehnoloģija veic embrija PGD ar četrām metodēm:

Apsveriet katras tehnikas specifiku.

Molekulārā citoģenētiskā metode ir metodes otrais nosaukums. To plaši izmanto pēcpadomju telpā, tai ir vislielākā demokrātiskā vērtība. Būtisks fluorescences in situ hibridizācijas (zivju) trūkums ir diagnozes neprecizitāte, jo šī metode pārbauda tikai daļu hromosomu.

PGD ​​metodei zivis aizņems 5 stundas. Šajā laikā ģenētists noteiks šādus svarīgus faktorus:

  • Hromosomu secība
  • Dzimums,
  • Visbiežāk sastopamo ģenētisko noviržu klātbūtne.

Šo metodi sauc par salīdzinošo genoma hibridizāciju. Tas aizņem daudz vairāk laika un maksās vairāk. Tomēr šai metodei ir vairākas svarīgas priekšrocības, kas to atšķir no citiem pētniecības veidiem:

  • "Atrod" dzīvotspējīgākos embrijus ar vislabāko implantācijas potenciālu.
  • Tā pārbauda daudzas cilmes šūnas, kas ievērojami samazina nepareizas diagnozes risku.
  • Diagnostikas pasākumus veic ar saldētām olām, kas tiks pārnestas uz krioprotokolu.

PCR ir polimēru ķēdes reakcija. Tā spēj “atrast” ne tikai defektus hromosomu darbībā, bet arī monogēnās patoloģijas. Izmantojot PCR, tiek noteiktas antivielas no vecāku nesaderības un embriju Rēzus.

Svarīgs nosacījums pirms pētījuma veikšanas ir obligāta vecāku diagnoze attiecībā uz gēnu mutāciju klātbūtni. Šāds pētījums novērsīs kļūdas patoloģijas diagnostikā, kas rodas no šūnu mutācijas.

IVF, izmantojot donora olu, neparedz pētījumu ar PCR.

Augstas caurlaidības secība ir visprogresīvākā diagnostikas metode PGD. Tagad-paaudzes secība ir visdārgākā un efektīvākā ģenētiskā diagnoze, kas ļauj izpētīt visus 23 hromosomu pāri. Tiek veikta visa genoma analīze, jo pētījuma laikā tiek pārbaudīta DNS sekvences pareizība.

Ģenētiskās diagnozes izmaksas

IVF prasa nopietnus izdevumus. Ģenētiskā diagnoze palielina cenu reizēm, jo ​​procedūras aprīkojums un materiāli ir ļoti dārgi.

Nav iespējams sniegt nepārprotamu atbildi par to, cik daudz PGD izmaksas, jo pētījuma cena ir atkarīga no vairākiem faktoriem:

  • Diagnostikas metode
  • Pārbaudīto embriju skaits, t
  • Izmantojot papildu pārbaudes,
  • Hromosomu translokācijas pētījums.

Diagnostikas izmaksas ir atkarīgas no izmeklēto anomāliju skaita.

Maskavā PGD izmaksas uz vienu embriju ir no 25 000 līdz 30 000 rubļu. Lai iegūtu visaptverošu aptauju, jums ir jāmaksā no 100 000 līdz 250 000 rubļu.

PGD ​​analīzes nozīme

PGD ​​diagnostikas galvenā priekšrocība ir tā, ka visas medicīniskās procedūras tiek veiktas pirms grūtniecības, bet auglis joprojām ir ārpus dzemdes. Analīze ir svarīga pāriem ar paaugstinātu risku, ka embrijiem būs nopietnas hromosomu anomālijas, kas izraisīs:

  • aborts
  • problēmas ar implantāciju
  • izbalējot grūtniecība
  • bērna piedzimšanu, kam būs intelektuāla vai fiziska invaliditāte.

Citāts: "Embriju savlaicīga PGD palīdz novērst problēmas, daudzas reizes palielina izredzes, ka grūtniecība beigsies ar veselīga bērna piedzimšanu."

Marina V. Shapnevskaya, klīnikas “For Birth” embriologs

Interesanti, ka IVF ar PGD ļauj plānot pat augļa dzimumu.


Šūnu savākšana PGD analīzei

PGD ​​indikācijas ar IVF

Ne visi pāri, kas nolemj iziet IVF, veic PGD diagnostiku. Šāda veida pētījumiem ir stingras medicīniskās norādes. Parasti laulātie, kuriem ir augsts risks pārnest bīstamos ģenētiskos traucējumus, kļūst par kandidātiem pirmsimplantācijas analīzei.

PGD ​​galvenie mērķi IVF ietver:

  • embriju ar kariotipa anomāliju skrīningu, t
  • samazinot embriju pārnešanas risku dzemdes dobumā, kam būs ģenētiskas novirzes, t
  • savlaicīga embriju atklāšana, kam ir nosliece uz smagiem ģenētiskiem traucējumiem, t
  • izveidojot nedzimušā bērna dzimumu, lai novērstu ar dzimumu saistītu slimību pārnešanu, t
  • iemeslu noteikšana, kāpēc implantācija nenotika iepriekšējos in vitro apaugļošanas mēģinājumos, t
  • embrija Rh faktora noteikšana, lai izslēgtu bērna ar hemolītisku slimību dzimšanu, t
  • veicot HLA rakstīšanu, ja nākamajam bērnam jākļūst par vecāka brāļa vai māsas donoru.

Saņemto bioloģisko materiālu izpēte

Indikācijas embrija diagnosticēšanai pirms IVF ir:

  • sievietes vecums ir vecāks par 35 gadiem, un vīrietis ir vecāks par 40 gadiem,
  • spermatogēnās anomālijas,
  • viens no laulātajiem ir hromosomu vai ģenētisku patoloģiju nesējs šūnu šūnās, t
  • vairāki neveiksmīgi IVF mēģinājumi,
  • pastāvīga aborts abās valstīs (ja vēsturē ir divi vai vairāk aborts), t
  • augļa nāve iepriekšējās grūtniecības laikā Rh-konflikta dēļ.

Embriju ģenētiskās diagnostikas metodes pirms implantācijas

IVF ar PGD var ietvert tikai olas vai gatavus embrijus. Pēdējais variants ir vairāk vēlams, jo tas ir pēc iespējas informatīvāks - olu šūnā ir tikai sievietes ģenētiskais materiāls un abi vecāki embrijā.


Materiālu paraugu ņemšana PGD analīzei parasti tiek veikta 3. dienā

Analīzes laikā viena blastomēra biopsija tiek veikta embrijā no četriem līdz desmit esošiem, kas atrodas šķelšanās stadijā. Tas parasti notiek trešajā dienā. Veiktās manipulācijas negatīvi neietekmē turpmāko augli.

Pārbaudot embrijus (tas aizņem līdz divām dienām), tie tiek pārnesti dzemdes dobumā, kā tas ir parastajā IVF protokolā. Ir svarīgi, lai pārstādīšana tiktu veikta ne vēlāk kā piektajā cilvēka ķermeņa attīstības dienā.

Ja tiek izmantota krioprezervācija, tad PGD diagnostikas potenciāls ir plašāks. Tātad, ja jūs lietojat biopsiju un pēc tam saglabāsiet embrijus, jūs varat veikt visus nepieciešamos pētījumus bez steigas un pārstādīt nākamo ciklu.

PGD ​​embriju metodes

Ir vairākas efektīvas metodes pirmsimplantācijas diagnostikai:

  • ZIVIS. Attiecīgs, ja nepieciešams izslēgt strukturālu vai skaitlisku hromosomu anomāliju klātbūtni - translokācijas un aneuploīdiju. Biopsijas laikā iegūtais materiāls tiek pārnests uz stikla slaidu, uzkarsēts līdz noteiktai temperatūrai un pēc tam pakāpeniski atdzesēts. Šajā gadījumā apvalks ir bojāts, izdalās citoplazma. DNS segmenti ir marķēti ar īpašām krāsvielām - fluorescējošām zondēm. Pēc tam, izmantojot fluorescējošu mikroskopu, ģenētists var skaitīt hromosomu skaitu, pārbaudīt, vai starp tiem ir kādas patoloģiskas.
  • Ngs. Šī ir jaunākā PGD diagnostikas metode kriogēnā, izmantojot kuru jūs varat rūpīgi pārbaudīt 23 hromosomu pārus. Ar NGS iegūto datu precizitāte ir 99,9%, ti, kļūdas ir maz ticamas. Tehnoloģija arī ļauj noteikt hromosomu un monogēnās anomālijas, mutācijas, lai nošķirtu translokāciju no veselas hromosomu kopas, tādējādi novēršot nepieciešamību pēc blastomēra biopsijas.
  • Polimerāzes ķēdes reakcija (PCR). Metode, kuras mērķis ir noteikt specifiskas DNS kopijas. Lai to izdarītu, tas vispirms tiek denaturēts, lai atbrīvotu dubultu vītni. Tad viņi paņem vienu fragmentu, pievieno tam specifiskus fermentus un lēnām divkāršo ģenētiskā materiāla daudzumu. Tas ļauj pētniekam redzēt bojātās nukleotīdu zonas. PCR metode ir parādīta, kad ir nepieciešams izslēgt monogēnu slimību pārnešanu bērnam (ja kāds no viņu partneriem vai abiem ir neveselīgu gēnu nesēji vai ir klīniskas bīstamas ģenētiskās patoloģijas izpausmes).

Jāatzīmē, ka PGD metodes IVF nav savstarpēji aizvietojamas. Katrs no tiem ir paredzēts, lai identificētu konkrētas slimību grupas. Tāpēc tikai ārsts var izlemt, kura no metodēm ir piemērotāka laulātajam pārim, kurš ir iesniedzis pieteikumu.


PGD ​​- veselīga bērna dzimšanas garantija

PGD ​​embriji - pakalpojumu izmaksas

IVF embriju PGD ir diezgan dārgs pakalpojums. Maskavas klīnikā “Par dzimšanu” tā cena svārstās no 83 500 līdz 90 500 rubļu. Šī procedūra ir ļoti sarežģīta un ietver dārgu iekārtu un novatorisku izejmateriālu izmantošanu. Lai to veiktu, var tikai augstākā līmeņa eksperti.

Klīnikā „Par dzimšanu”

Salīdzinoši augstās ģenētiskās diagnozes izmaksas pirms implantācijas ir saistītas ar manipulāciju sarežģītību. Ja izsekojat specializēto klīniku piedāvājumus, PGD var tikt nodots labvēlīgākos apstākļos.

Nauda, ​​kas samaksāta par PGD analīzēm, vienmēr maksā pati par sevi - galu galā ir apdraudēta veselīga bērna dzimšana. Bērna ar smagām ģenētiskām novirzēm ārstēšana un uzturēšana maksā vecākiem daudz lielāku summu.

Vai IVF ir bīstams ar PGD?

Преимплантационная генетическая диагностика применяется во всем мире. Ее безопасность научно доказана. Биопсия осуществляется только на том этапе развития эмбриона, когда его клетки еще не дифференцированы. Tas nozīmē, ka ar turpmāku saspiešanu noņemto šūnu nomainīs citi, neradot nekādas sekas nākotnes auglim.

PGD ​​nepalielina attīstības defektu iespējamību bērnam, bet gluži pretēji, garantē veselīga bērna dzimšanu.

Viņi pgd veica NGC Sanktpēterburgā, tur bija arī viss protokols. Mans vīrs un es esam veci (38 un 40 gadi), ļoti noraizējies! Un laba iemesla dēļ. Ārsts Gvasalia teica, ka mūsu gadījumā pgd ir praktiski obligāta procedūra. Tika pārbaudīti četri embriji, procedūra atklāja veselīgākos: divi tika stādīti. Pieaug divus mēnešus. )
Procedūra ir pārsteidzoša un ļoti noderīga! Protams, mēs bijām nobažījušies, ka biopsija bija bīstama, bet NGC viņi mums visu paskaidroja, viņi pat parādīja procesa video, un patiešām nekas nepareizi, tikai priekšrocības! Vēl joprojām ir dažādas metodes pgd, mēs izvēlējāmies NGC. Pēc ārstu domām, visprecīzākais.
>> PGD nepalielina attīstības defektu iespējamību bērnam, bet, gluži pretēji, garantē veselīga bērna dzimšanu.

Tā ir taisnība! Izmantojiet modernās tehnoloģijas, mēs esam 21. gadsimtā))

Vispārīgi jēdzieni

Pirms implantācijas ģenētiskā diagnoze ļauj veikt visaptverošu pārbaudi un izslēgt hromosomu anomāliju klātbūtni kopumā vai vienu specifisku novirzi. Nesen, paralēli agrīniem defektiem, tika veikta gēnu, kas var izraisīt audzēju rašanos pieaugušajiem (olnīcas, zarnas, krūtis), skrīnings.

Ģenētisko slimību pārvadāšanas gadījumā, ko veic māte, pirms mēslošanas tiek veikta vairāku polāru olu šūnu biopsija. Aprakstītās metodes ir alternatīva agrīnai pirmsdzemdību diagnozei, kas ļauj novērst grūtniecības pārtraukšanu, ja pēkšņi auglim būs ģenētiska patoloģija.

Pirms implantācijas ģenētiskā diagnoze ļauj jums noteikt nākamā bērna dzimumu jau skrīninga procesā. To izmanto, lai novērstu ar dzimumu saistītu anomāliju attīstību.

Kas tiek pārbaudīts?

Pirms implantācijas ģenētiskā diagnoze (PGD) tiek veikta šādos gadījumos:

  1. Viena vai abu pāru iedzimtu slimību vai kariotipa izmaiņu klātbūtne. Bieži vien partneri paši zina par savām problēmām, retāk - viņi uzzinās skrīninga procesā.
  2. Pastāvīga aborts. Problēma ar to nav vecāku anomālijas (tās var nebūt vispār), bet augļa ģenētiskās mutācijas, kas izraisa spontāno abortu.
  3. IVF programmā iesaistīto personu vecums pārsniedz 38 gadus.
  4. Vairāk nekā 3 neveiksmīgi mēģinājumi apaugļot in vitro vēsturē.
  5. Vīriešu neauglība.
  6. ICSI (intracitoplazmas spermas injekcijas) iekļaušana mēslošanas programmā. Šis process ir pilns ar ģenētisko noviržu attīstību embrijā.
  7. Gadījumi, kad notikusi slīdēšana vēsturē.

PGD ​​funkcijas

Pētījumi pirms implantācijas ģenētiskās diagnozes liecina, ka šai metodei ir tiesības pastāvēt, palīdz diagnosticēt un novērst hromosomu anomālijas, tomēr ir nepieciešama turpmāka uzlabošana.

Funkcijas PGD ir šādas:

  • spontāno abortu skaits skrīninga laikā ir zemāks nekā bez tā,
  • Pašlaik nav pierādījumu par to, ka grūtniecības iespēja palielinās, t
  • pastāv viltus rezultāts: embrijs ir vesels, un rezultāts liecina par novirzēm, embrijs ir slims, un pētījums liecina citādi (5-10% gadījumu).

Ģenētiskās diagnozes sagatavošana pirms implantācijas (blastomēru izmeklēšana)

Pēc vienošanās par apaugļošanu in vitro, reproduktologs novērtē nepieciešamību pēc laulāto pāru PGD. Ja ir pierādījumi, partneri var vienoties vai noraidīt procedūru. Pēc tam tiek parakstīts dokuments, kas apliecina atļauju veikt aptauju.

Trešajā dienā pēc embrija apaugļošanas ģenētists analizē vienu no veidotajām blastomēra šūnām. Tiek uzskatīts, ka tas neietekmē augli, jo visas šūnas ir savstarpēji aizvietojamas.

Speciālists veic pētījumus vienā no iepriekš izvēlētām jomām: šūnas struktūras izpēte īpašā fluorescējošā mikroskopā, DNS izpēte, izmantojot polimerāzes ķēdes reakcijas metodi, lai noteiktu mutācijas klātbūtni.

Pamatojoties uz rezultātu, embriji, kuriem ir anomālijas, netiks izmantoti implantācijas procesā. Veselīga un kvalitatīva izvēle. Tad viens vai vairāki no tiem tiek pārnesti mātes dzemdes dobumā.

Ar polāro ķermeņa biopsiju pārbauda mātes hromosomu komplektu. Tas tiek veikts gadījumā, ja sieviešu līnija atklāja ģenētiski noteiktu patoloģiju. Procedūra ļauj jums noteikt, vai ola ir veselīga, kas tiks izmantota mēslošanai, nepārkāpjot tās struktūru. Ja nav konstatētas anomālijas, tad to var izmantot apaugļošanai un pārvietošanai dzemdes dobumā.

Ir gadījumi, kad tiek pārbaudīti polārie ķermeņi un pēc tam blastomēri. Tas ļauj iegūt ticamāku rezultātu. Shēmu, saskaņā ar kuru notiks pārbaude, izvēlas ģenētists.

Izmantotās metodes

Kromosomu skaitliskie un strukturālie traucējumi tiek noteikti, izmantojot fluorescējošās hibridizācijas metodi. Šī metode ļauj norādīt šūnas DNS secību. Tiek izmantoti speciāli DNS zondes, kas to struktūrā ir blastomēra DNS zonu komplementārie reģioni.

Zonde satur nukleotīdu un fluoroforu (molekulu, kas spēj fluorescēt). Pēc mērķa DNS mijiedarbības ar DNS zondi, tiek veidotas apgaismotas zonas, kuras skatās fluorescējošā mikroskopā.

Izmantojiet arī PCR metodi (polimerāzes ķēdes reakcija). Tā sastāv no DNS daļas kopēšanas, izmantojot fermentus noteiktos laboratorijas apstākļos.

Aneuploīda diagnoze

Tā ir viena no pirms implantācijas ģenētiskās diagnozes metodēm, kas ļauj noteikt skaitlisku hromosomu anomāliju klātbūtni (lai noteiktu papildu vai trūkstošās hromosomas).

Ģenētiskais materiāls sastāv no 46 hromosomām, no kurām puse ir tēva, bet otra puse - māte. Ja embrijs iegūst papildu hromosomu, to sauc par trisomiju un jebkuras monosomijas zudumu. Šie defekti var izraisīt šādas sekas:

  • nav embriju implantācijas
  • spontāns aborts,
  • iedzimtas patoloģijas (Dauna sindroms, Klinefelter, Shereshevsky-Turner).

Vīriešu neauglība un precētu pāru vecums ir bieži sastopami šādu anomāliju attīstībā.

PGD ​​monogēnās patoloģijas

Embriju pirmsstimācijas ģenētiskā diagnoze, lai noteiktu monogēnu slimību klātbūtni, tiek veikta ģimenēs, kurās konstatētas iedzimtas anomālijas. Ja pārim jau ir bērns ar viendabīgu slimību, tad vairākas reizes palielinās iespēja saņemt citu slimu bērnu.

Iemesls ir hromosomu secības pārkāpums noteiktā DNS daļā. Šīs slimības ietver:

  • cistiskā fibroze,
  • adrenogenitālais sindroms
  • fenilketonūrija,
  • hemofilija
  • sirpjveida šūnu anēmija,
  • Vernig-Hoffman sindroms.

Metodes priekšrocības un riski

Preimplantācijas ģenētiskajai diagnozei, kuras pārskatīšana tiek uzskatīta par neskaidru, ir dažas priekšrocības pirmsdzemdību skrīninga jomā:

  • Dzemdē tiek nodoti tikai augstas kvalitātes un veselīgi embriji,
  • samazina risku, ka bērnam ir ģenētiskas novirzes, t
  • dubultot aborts,
  • dubultojies daudzveidīgas auglības risks,
  • embriju implantācijas iespēja palielinās par 10%, t
  • 20% palielināt veiksmīgas bērna dzimšanas iespēju.

Emocijas nejaušas bojājuma risks ar PGD ir 1%. Kļūdaina rezultāta varbūtība ir 1:10, turklāt 3% no iespējamības, ka embrijs ar jebkuru anomāliju tiks novērtēts kā veselīgs.

Varbūtība, ka veselīgs embrijs tiks novirzīts no rezultātiem, ir 1:10. 1: 5 iespēja, ka embriju nodošana dzemdē tiks atcelta katrā no tām konstatēto noviržu dēļ.

Kontrindikācijas

Ģenētiskajai diagnostikai pirms implantācijas (PGD), kuras sekas embrijam nav precīzi identificētas, ir vairākas kontrindikācijas, lai:

  • embriju fragmentācija ir lielāka par 30% (fragmentu veidošanās līdz 25% tiek uzskatīta par normālu), t
  • daudzcūru blastomēru klātbūtne embrijā, t
  • embrijam ir mazāk nekā 6 blastomērus trešajā attīstības dienā.

Metodes drošība

Diagnoze tiek veikta agrīnā stadijā nākotnes organisma radīšanā, kad visas tās šūnas ir polipentējas, ti, no katras var veidoties pilnvērtīgs veselīgs organisms.

Visi PGD posmi neizraisa laiku embrijam, auglim un nedzimušam bērnam. Pēc tam, kad ir iegūts pētījuma paraugs, tas ir sagatavots īpašā veidā. Šūnas novieto uz stikla slaida, uz kuras tās ir nostiprinātas, vai buferšķīdumā.

Procedūras izmaksas

No pirmā acu uzmetiena, pirms implantācijas ģenētiskā diagnostika, kuras izmaksas svārstās no 50 līdz 120 tūkstošiem rubļu, šķiet, ir dārga manipulācija. Tomēr bērna ar ģenētiski noteiktu patoloģiju veselība un ārstēšana izmaksās daudz vairāk.

Procedūra sniedz visas priekšrocības salīdzinājumā ar sievietēm, kas dabiski var iedomāties bērnu, jo šāda diagnostikas metode viņiem nav pieejama. Pirms implantācijas ģenētiskā diagnostika, kuras cena ir zema, salīdzinot ar pašu apaugļošanu in vitro, kalpo tikai kā papildinājums vispārīgajai programmai, kas ļauj ne tikai nēsāt un dzemdēt, bet arī radīt veselīgu bērnu.

Kā ģenētiskās slimības tiek mantotas?

Ne katrs vecāku mutācijas vai defekts zīme var izraisīt bērna slimības izpausmes. Tas viss ir atkarīgs no tā, vai dominējošā vai recesīvā iezīme ir pārmantota no katra laulātā, un kāda kombinācija ir bērniem.

Ja gēns, kas dominē līdzīgā nemainīgā veidā, tiek nodots bērnam, tad pastāv 50% risks, ka parādīsies iedzimta patoloģija. Vecākiem ar recesīvās slimības gēnu ir sāpīga ģenētiskā iezīme. Lai bērns varētu veidot patoloģijas klīniskos simptomus, viņam ir jāizmanto divi recesīvie gēni.

Ir arī ar dzimumu saistītas slimības. Sievietēm divdesmit trešais hromosomu pāris ir XX, vīriešiem, XY. Ja sievietes ģenētiskajā materiālā viena no hromosomām ir bojāta, tad otrās dēļ slimības attīstība ir bloķēta, bet ir patoloģiskā gēna nesējs. Vīriešiem Y hromosoma nespēj bloķēt patoloģiskās X hromosomas ietekmi, tāpēc slimība izpaužas šāda pāra dēliem, un meitas 50% ir pārveidotā gēna nesēji.

Embriju pirmsimplantācijas ģenētiskā diagnoze palīdz noteikt ar 100% precizitāti, kādā kombinācijā ģenētiskais materiāls ir iedzimts, bērns izpaužas slimībā, vai tas būs patoloģisku pazīmju nesējs.

Kam ir jāveic ģenētiskie pētījumi?

PGD ​​ir zināmas norādes. Ieteicams veikt pētījumu sievietēm, kuras vēlas dzemdēt pēc 34 gadiem. Šajā vecumā pat ar grūtniecības dabisku rašanos palielinās risks, ka bērnam ir ģenētiskas novirzes.

Oocīti pakāpeniski noveco, tiek pakļauti dažādiem negatīviem faktoriem visā dzīves laikā:

  • slikti mātes ieradumi (smēķēšana, alkohola lietošana),
  • hroniskas slimības
  • ārstēšana ar narkotikām,
  • kaitīgi darba apstākļi (ķīmiskie reaģenti, fizikāli faktori augstās temperatūrās, vibrācija, jonizējošais starojums, elektromagnētiskie lauki), t
  • slikta ekoloģija.

Ar vecumu uzkrājas bojātas olas, palielinot patoloģisko gēnu pārnešanas risku pēcnācējiem. Ja šāds embrijs tiek pārnests uz dzemdi, tad vairumā gadījumu tas nenonāk, grūtniecība tiks pārtraukta ar aborts. Vai, ja grūtniecība progresē, turpmākā pārbaude atklās patoloģiju, kas kļūs par norādi pārtraukšanai. Preimplantācijas diagnoze palīdz izvairīties no psiholoģiskām traumām, kas saistītas ar aborts vai mazāka bērna piedzimšanu. Cilvēks iekrīt vecuma grupā, kas ir vecāka par 39 gadiem. Tas ietver laulāto ar spermatogenizācijas patoloģiju.

Sievietēm ar pastāvīgu aborts ir arī ieteicams PGD. Vienam no vecākiem var būt hromosomu defekts, kas ietekmē embrija attīstību un izraisa aborts.

Noteikti aptaujājiet pāriem, kuriem ir autosomāla dominējošā patoloģija. Viņu bērni 50% apmērā būs gēnu nesēji vai slimības klīniskās pazīmes.

Veikt arī pētījumus ar:

  • 2 vai vairāk neveiksmīgi IVF mēģinājumi,
  • 3 vai vairāk mēģinājumi nodot augstas kvalitātes embrijus sievietēm, kas jaunākas par 35 gadiem, un kas nav beigušās grūtniecības laikā,
  • riska grupa, kas saistīta ar novēlotu slimību t
  • vēlme, lai bērns būtu saderīgs ar HLA sistēmu, lai iegūtu cilmes šūnas, lai ārstētu citu bērnu ar smagu slimību, t
  • bērna, kas ir saderīgs ar Rh faktoru konflikta novēršanai, dzimšana.

PGD ​​palīdz novērst pēcdzemdību diagnozi - amniocentēzi, kas samazina abortu risku.

Pētījuma mērķi

Pamatojoties uz norādēm par diagnozi, varat definēt tās mērķus:

  1. Embriju izslēgšana ar patoloģisku kariotipu.
  2. Neveiksmīgas implantācijas cēloņu noteikšana iepriekšējās IVF laikā.
  3. Samazināt risku, ka vecākiem ir bērns ar anomālijām.
  4. Embriju identifikācija ar noslieci uz nopietnām slimībām.
  5. Bērna, kurš ir HLA, brāļa vai māsas ārstēšanai.
  6. Samazinot hemolītiskās slimības risku bērna piedzimšanas brīdī ar noteiktu Rh faktoru.

Lai identificētu: t

  • cistiskā fibroze,
  • Tay-Sachs slimība,
  • A hemofilija,
  • Duchenne myodystrophy,
  • sirpjveida šūnu anēmija.

Kromosomu anomāliju meklējumos ietilpst deviņu no tām pētījums, kas ir šādu sindromu cēlonis:

  • Uz leju (trīsdesmit 21 hromosomas),
  • Patau (13. hromosoma),
  • Edvards (18),
  • Shereshevsky-Turner,
  • Klinefelter,
  • "Feline skolēni" (22),
  • hromosomas 15, 16, 17.

Arī ģenētiskā meklēšana ļauj identificēt daudzas citas slimības.

Diagnostikas metodes

PGD ​​izmanto embrijus vai olas. Taču pirmajā gadījumā pētījums ir informatīvāks embrijam ir tēva ģenētiskais materiāls, kas var pārnēsāt bojātus gēnus.

Pētījumā tika veikta vienas blastomēra biopsija 4–10 gadu vecā embrijā, kas atrodas sasmalcināšanas stadijā. Tas notiek 3-5 dienas. Netiek piemērots kaitējums nākotnes auglim.

Šo metodi var izmantot tikai IVF procedūrā kopā ar ICSI - mākslīgo apsēklošanu ar spermu. Tas tiek darīts tā, ka blastomēra biopsijas procesā spermatozoīdu ģenētiskais materiāls, kas nebija iesaistīts mēslošanā, netiek pētīts.

Turpmāka embrija pārnešana un grūtniecības vadība notiek tāpat kā parastajā IVF. Analīzei ir piešķirtas tikai 2 dienas, pārstādīšanai jānotiek ne vēlāk kā piecu dienu laikā. Vairāk iespēju diagnosticēt ciklu ar krioprezervāciju. Ja veicat dažu embriju biopsiju un pēc tam tos saglabājat, tad jūs varat droši veikt maksimāli iespējamos pētījumus un nākamajā ciklā pārstādīt augstas kvalitātes embriju.

Izstrādātas vairākas PGD metodes.

Izmanto, lai diagnosticētu skaitliskas vai strukturālas hromosomu izmaiņas - aneuploīdiju un translokāciju. Ar biopsiju iegūto šūnu fiksē uz slaida, apsilda un atdzesē. Kad tas notiek, tās korpusa plīsums un citoplazmas atbrīvošanās. DNS segmenti ir marķēti ar fluorescējošām zondēm - īpašām krāsvielām. Turklāt īpašā fluorescējošā mikroskopā var rēķināt specifiskas hromosomas, noteikt normālu un patoloģisku.

Polimerāzes ķēdes reakcija balstās uz konkrētu DNS kopiju identifikāciju. Vispirms tas ir denaturēts, lai atbrīvotu dubultu diegu un iegūtu vienu fragmentu. Pievienojot īpašus enzīmus, ģenētiskā materiāla daudzums tiek pakāpeniski dubultots. Tas ļauj jums noteikt defektu vietas nukleotīdā. Šo metodi izmanto monogēnu slimību meklēšanai, kad viens vai divi laulātie ir definēti kā bojātu gēnu nesēji vai slimības klīniskās pazīmes.

  • Jaunākā NGS tehnika

Inovācija ir ģenētiskā diagnoze pirms implantācijas kriociklā, izmantojot NGS metodi, ar kuras palīdzību ir iespējams izpētīt visus 23 hromosomu pāri. Tās precizitāte sasniedz 99,9%. Tajā pašā laikā notiek pētījums par monogēnām un hromosomu patoloģijām, kā arī mutācijām. Šī metode ļauj atšķirt līdzsvarotas translokācijas no normālās hromosomu kopas. Tādēļ nav nepieciešams atkārtot blastomēru biopsiju. Augsta procesa automatizācija novērš papildu kļūdas.

Ieguvumi un riski

Izmantojot embriju ģenētisko analīzi šķelšanas posmā, palielinās veiksmīgas implantācijas iespējas. Доказано, что хромосомные изменения у зародышей увеличивают вероятность выкидыша на раннем сроке, формирование неразвивающейся беременности. В 21% случаев самопроизвольного прерывания беременности, в том числе полученной методом ЭКО, причиной прерывания становится хромосомная патология плода. С возрастом количество аномалий увеличивается в геометрической прогрессии.Ja uzskatām, ka vecāka gadagājuma sievietes visbiežāk tiek izmantotas ar reproduktīvo palīdzību, kļūst skaidrs, ka diagnostika jāveic pirms embriju pārstādīšanas.

Iegūto informāciju ārsts var izmantot turpmākajos IVF mēģinājumos, kā arī ieteikt iemeslus, kādēļ agrāk neveiksmīgie mēģinājumi apaugļot.

Izmantojot PCR vai fluorescējošu metodi, var pārbaudīt tikai noteiktu skaitu hromosomu. Tāpēc daži defekti var būt iedzimti.

Tas notiek, ja pirms implantācijas ģenētiskā diagnoze nenormāla embrija tiek definēta kā normāla. Šajā gadījumā turpmākā pirmsdzemdību diagnoze palīdzēs precīzi diagnosticēt patoloģiju. Šajā zinātnes attīstības posmā PGD nespēj pilnībā aizstāt pēdējo. Dažreiz ģenētiskās anomālijas veido mozaīka. Šādā gadījumā viena blastomēra biopsija apstiprinās embrija normālo stāvokli, un slimība radīsies no mainītās šūnas vainas.

Embriju bojājumi biopsijas laikā ir ļoti reti, 0,1% gadījumu. Jāatceras arī tas, ka pat pēc veiksmīgas diagnostikas un normālas embrija pārstādīšanas IVF var neizdoties nezināmu iemeslu dēļ. Šajā gadījumā cēlonis var būt mātes ķermeņa imūnsistēmas traucējumi, diagnosticētas slimības. Tikai pilnīga IVF sagatavošanas pārbaude, veselīgs dzīvesveids palielina grūtniecības iestāšanās iespējas.

Saturs

Ideja par pirmsimplantācijas ģenētisko diagnozi parādījās pirms pirmā IVF bērna dzimšanas. 1967. gadā R. Edwards publicēja rakstu.R. G. Edvards) un R. Gardner (R. L. Gardner) par trušu embriju biopsijas veikšanu dzimuma noteikšanai pirms implantācijas, kurā autori prognozēja līdzīgu tehnoloģiju parādīšanos cilvēkiem [2]. Tomēr pirmsimplantācijas ģenētiskā diagnostika cilvēkiem kļuva iespējama tikai 90. gadu sākumā, kad tika sasniegts pietiekams in vitro apaugļošanas tehnoloģiskais līmenis, un tika izstrādāta polimerāzes ķēdes reakcija, kas ļauj DNS analīzi atsevišķās šūnās.

1989. gadā pirmais veiksmīgais mēģinājums noteikt dzimumu tika veikts, izmantojot blastomēra PCR analīzi, kas ņemta no embrijas šķelšanas stadijā (6-8 blastomēri) [3]. Pirmās veiksmīgās piegādes pēc līdzīgas procedūras pāriem, kuriem bija risks saslimt ar recesīvo slimību, notika 1990. gadā [4].

1990. gadā pirms mēslošanas tika diagnosticēta monogēna slimība, un šī metode ietvēra polāro olu šūnu PCR analīzi [5].

Pirmā bērna piedzimšana pēc monogēnas slimības (cistiskās fibrozes) pirmsimplantācijas PCR diagnozes notika 1992. gadā [6].

Pēc tam, lai noteiktu embrija dzimumu, kā arī hromosomu anomālijas, tika izmantota fluorescējošā hibridizācija in situ (FISH). Sākot ar 2012. gadu, FISH metode hromosomu anomāliju noteikšanai pakāpeniski tiek aizstāta ar salīdzinošo genoma hibridizāciju. PCR metode palika neaizstājama monogēnu slimību diagnosticēšanai.

Preimplantācijas ģenētiskā diagnoze ir paredzēta pāriem, kuriem ir hromosomu pārkārtošanās vai monogēnas slimības nesējs. Monogēnu slimību piemēri ir cistiskā fibroze, Tay-Sachs slimība, sirpjveida šūnu anēmija, A hemofilija, Duchenne muskuļu distrofija un daudzi citi.

Turklāt pirmsimplantācijas ģenētiskā diagnoze tiek veikta pāriem ar paaugstinātu iedzimtu anomāliju risku bērniem, kas nav saistīta ar diagnosticētu mutāciju pārvadāšanu. Šādi gadījumi ir pāri, kur mātes vecums ir vecāks par 35 gadiem, ja tēva vecums ir vecāks par 39 gadiem, ja tēvam ir smaga spermatogēze, pāriem ar pastāvīgu aborts, pāriem ar atkārtotiem neveiksmīgiem IVF mēģinājumiem.

Ja nenoteikts paaugstināts risks, ka bērnam ir iedzimtas anomālijas, pirmsimplantācijas ģenētiskā diagnoze tiek veikta deviņām hromosomām, kas saistītas ar visizplatītākajām iedzimtajām slimībām. Tie ir 13. hromosoma (Patau sindroms), 15. hromosoma (Pradera-Villija sindroms), 16. hromosoma, 17. hromosoma, 18. hromosoma (Edvarda sindroms), 21. hromosoma (Dauna sindroms), 22. hromosoma („kaķu skolēnu sindroms”) un arī sekss hromosomas X un Y (dažādas skaitliskas anomālijas, ieskaitot Šerševska-Turnera sindromu un Kleinfeltera sindromu).

Dažos gadījumos, kas nav saistīts ar iespējamo augļa ģenētisko patoloģiju, tiek veikta ģenētiskā diagnoze, ko veic pirms implantācija, šādas diagnozes mērķis ir bērna ar noteiktu ģenētisko īpašību piedzimšana. Šādi gadījumi ietver, piemēram, pirmsimplantācijas ģenētisko diagnostiku, ko veic, lai novērstu rēzus konfliktu.

Ir gadījumi, kad tiek apvienoti vairāki priekšdzemdību ģenētiskās diagnozes priekšnosacījumi. Viens šāds piemērs ir gadījums, kad, izmantojot pirmsimplantācijas ģenētisko diagnozi, probandā dzimis HLA saderīgs donors Fankoni anēmijas šūnu terapijai [7]. Šajā gadījumā tika izslēgta Fanconi anēmija, un tika izvēlēts vēlamais histokompatibilitātes veids.

Pirmsimplantācijas diagnoze ir iespējama tikai IVF ārstēšanas cikla ietvaros vai drīzāk in vitro apaugļošana ar spermatozoīdu (ICSI) intraplasmisku injicēšanu, tas ir, spermatozoīdu ievada olā "manuāli" ar mikrosķirurģisko instrumentu palīdzību. ICSI procedūra ir nepieciešama, jo normālā IVF olu šūnā tiek pievienots liels skaits spermas. Tad, vācot polāros ķermeņus vai blastomērus, pastāv risks, ka spermatozoīdu ģenētiskais materiāls, kas nepiedalījās mēslošanā, nonāk analīzē ar embrija šūnu.

Sagatavošanās ārstēšanas ciklam un IVF ārstēšanas cikls ar PGD pats neatšķiras no parastā IVF ārstēšanas cikla:

  1. sieviete saņem hormonālas zāles, lai stimulētu superovulāciju,
  2. transvaginālā folikulu punkcija,
  3. olšūnu apaugļošana ar spermu tiek veikta embrioloģijas laboratorijā, t
  4. embrija pārnešana uz dzemdi aizņem 5-6 dienas.

Ja ģenētisks traucējums tiek pārmantots no sievietes, tad “veselus” embrijus var izvēlēties, veicot testa procedūru tikai polāriem ķermeņiem, nepieskaroties pašam embrijam. Varat arī pārbaudīt tikai blastomērus. Vai arī var veikt secīgu polāro ķermeņu, tad blastomēru, izpēti.

Kāda veida PGD shēma tiks piemērota katrā konkrētajā gadījumā, konsultējoties ar ģenētisko ārstu vai īpaši apmācītu PGD konsultantu, plānojot PGD.

Pirmajā meiozes sadalījumā ir sadalīta 1. kārtas oocīts, kā rezultātā veidojas otrās kārtas oocīts un neliels pirmais samazināšanas ķermenis (abas šūnas ar haploīdu hromosomu kopu). Otrajā meiozes dalījumā 2. kārtas oocītu dalīšanās rezultātā tiek veidota viena olu šūna un otrais reducēšanas korpuss. Pirmais samazināšanas korpuss dažreiz arī sadalās divās identiskās mazās šūnās. Šo 1. kārtas transformāciju rezultātā veidojas viena olšūnas un trīs redukcijas ķermeņi, kur gan olu šūnai, gan reducēšanas struktūrām ir haploīds hromosomu kopums. Tādējādi ir iespējams izpētīt polāros ķermeņus, lai noteiktu, vai ola ir pārmantojusi ģenētisku defektu.

Pēc olu apaugļošanas ar spermu embrioloģijas laboratorijā, embrijs attīstās - šūnas sadala. Trešajā dienā embrijs sastāv no 6-8 blastomēriem. Un trešajā dienā tiek iegūti bioloģiskie materiāli ģenētiskai izpētei - tā sauktajai „embriju biopsijai”, tas ir, viena blastomēra iegūšanai no embrija (un dažreiz arī polāriem ķermeņiem), izmantojot īpašus mikrotīklus. Procedūra nepārkāpj embrija turpmāko attīstību. Kamēr tiek veikta ģenētiskā diagnostika, embriji turpina attīstīties piemērotā barotnē līdz nodošanai dzemdei 5. attīstības dienā. Līdz tam laikam embrijam jāsasniedz blastocistu stadija.

Pirms nodošanas embriologs novērtē embriju struktūru un formu. Ģenētiskās diagnozes rezultāts tiek salīdzināts ar embriju morfoloģiju un izdarīts secinājums par to, kurus embrijus ieteicams nodot dzemdē. Pārvietošanai embriji ar labākajiem morfoloģiskajiem raksturlielumiem tiek izvēlēti bez ģenētiskiem traucējumiem.

Analīze tiek veikta ļoti īsā laikā. Blastomēru analīzei ir pieejamas tikai 2 dienas, jo embrijs nevar turpināt attīstību ārpus mātes ķermeņa ārpus blastocistu stadijas (5. diena pēc apaugļošanas), tāpēc pētījums ir jāveic īsā laikā.

Alternatīva pieeja ir veikt PGD kriociklā. Šajā gadījumā biopsija tiek veikta 5. attīstības dienā, un tūlīt pēc tam embriji tiek pakļauti krioprezervācijai. Nākamajā mēnesī tiek veikta ģenētiskā diagnoze, un ieteicamie embriji bez mutācijām tiek pārnesti uz dzemdes nākamā cikla laikā. Atslēgtā cikla praksei ir vairākas priekšrocības: mazāks pārmērīgas stimulācijas risks, vairāk materiālu un laika analīzei, mazāk traumatiska procedūra embrija biopsijai. Kriocikla trūkums ir ilgāks laiks no stimulēšanas sākuma līdz embriju pārnešanai [1].

  1. Attiecībā uz skaitliskām un strukturālām hromosomu anomālijām tiek izmantota FISH (fluorescējoša hibridizācija) in situ). Parasti veic trīs, piecu vai septiņu hromosomu skaitlisko traucējumu analīzi, visbiežāk 13, 18, 21, X un Y hromosomas.
  2. Mūsdienīga alternatīva FISH metodei ir salīdzinošā genoma hibridizācija uz mikroshēmām (GHS). GHS ļauj pārbaudīt visas hromosomas vienlaicīgi.
  3. Veicot monogēnu slimību PGD, tiek izmantota PCR metode.

Fluorescējošā hibridizācijas metode in situ (FISH) ir citogenētiskās analīzes metode, ko izmanto, lai identificētu un lokalizētu specifiskas DNS sekvences metafāzes hromosomās un starpfāzes kodolos. Šī metode izmanto DNS zondes, kas ir ierobežota izmēra nukleotīdu secība, kas ir komplementāra konkrētam kodola DNS reģionam. Zondei ir "atzīme", ti, satur nukleotīdus, kas saistīti ar fluoroforu (molekula, kas spēj fluorescēt). Pēc hibridizācijas procedūras zondes hibrīda DNS molekulas un mērķa DNS veidošanās gadījumā pētāmā citogenētiskā preparāta gadījumā, izmantojot fluorescences mikroskopu, var novērot specifisku DNS sekvences luminiscenci hromosomās vai kodolos.

Polimerāzes ķēdes reakcija ir metode, kas balstīta uz vairāku selektīvu DNS daļu kopēšanu, izmantojot fermentus mākslīgos apstākļos (in vitro). Ja tas notiek, tiek kopēts tikai apgabals, kas atbilst norādītajiem nosacījumiem, un tikai tad, ja tas atrodas pētāmajā paraugā.

Loading...